28°C температурада 25 күн статикалық инкубациядан кейін *Pleurotus ostreatus* NRC620 лактазасы саңырауқұлақ өсіру ортасында ең жоғары белсенділікті көрсетті. Бұл фермент үшін оңтайлы рН және температура мәндері сәйкесінше 3,0 және 70°C болды. 40°C және 50°C температурада 2 сағат инкубациядан кейін фермент белсенділігі сәйкесінше 68,33% және 59,61% сақталды. Цитрат-фосфат буферінде (рН 7,0) 2 сағат инкубациядан кейін фермент белсенділігі 100% деңгейінде қалды. 10 мМ MgSO₄ және CuSO₄ қосу фермент белсенділігін шамамен 21% және 35%-ға арттырды, ал NaCl, MnCl₂, KCl және CaCl₂ фермент белсенділігін тежеді. ABTS-ті субстрат ретінде қолданғанда, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 лактазасының кинетикалық параметрлері (Km және Vmax) сәйкесінше 1,99 мМ және 16 217 мкмоль мин−1 L−1 болды. Алма шырыны үлгілерін ферментативті өңдеу рН мен тұтқырлықты айтарлықтай төмендетті, және бұл төмендеу сақтау уақытының ұлғаюымен өзара байланысты болды. Лактазамен өңдеу алма шырынының жалпы фенолдық құрамының аздап төмендеуіне әкелді, бірақ антиоксиданттық белсенділіктің төмендеуі байқалмады.
Соңғы жылдары зерттеушілер тамақ өнеркәсібінде жасыл биотехнологияны қолдануға назар аударды. Лакказа тамақ өнеркәсібіндегі ең пайдалы ферменттердің бірі болып табылады, ол шырын өңдеу, пісіру, шарапты тұрақтандыру және тамақ өнімдерінің органолептикалық қасиеттерін жақсарту сияқты салаларда қолданылуын тапты.1Көптеген жоғары сатыдағы өсімдіктер мен микроорганизмдер лактаза бөліп шығарады,2дейтеромицеттер, аскомицеттер және базидиомицеттер сияқты саңырауқұлақтар да лакказа түзе алады.3Лакказа (EC 1.10.3.2) - үш түрлі мыс атомдарынан тұратын жүйені пайдаланып молекулалық оттегін суға дейін тотықсыздандыратын, осылайша әртүрлі фенолдық қосылыстар мен хош иісті аминдерді тотықтыратын көк оксидаза. Жеміс-жидек және көкөніс шырындарын өндіру кезінде ферментативті және ферментативті емес қоңырлау маңызды мәселелер болып табылады.4Бұл заттар шырынның түсіне, дәміне және хош иісіне теріс әсер ететіндіктен, оларды алып тастау керек.5
Барлық жемістердің ішінде алма бүкіл әлемде және Еуропалық Одақта ең көп тұтынылады. 2019 жылы алма өндірісі әлемде үшінші орынға ие болды, 87 миллион тоннадан асты.6Алма құрамында флавоноидтар мен кофеин қышқылы және хлороген қышқылы сияқты фенол қышқылдарын қоса алғанда, көптеген фенолдық қосылыстар бар.7Алма шырыны әдетте мөлдір түрінде тұтынылатындықтан, сүзу процесінде фенолдық компоненттердің шамамен 50%-дан 90%-ға дейіні жоғалады.8Бүгінгі таңда тұтынушылар полифенол мөлшері жоғары бұлтты алма шырыны сияқты аз өңделген өнімдерді таңдауға бейім. Дегенмен, фенол мөлшері жоғары болғандықтан, алма шырынының бұл түрі түсінің өзгеруіне және қарайуына өте бейім.9Алма шырынының қараюын азайту немесе болдырмау үшін 60-90°C температурада пастерлеу сияқты термиялық өңдеу әдістерін қоса алғанда, әртүрлі технологиялар қолданылады.10Алайда, Sauceda-Gálvez зерттеуі бойынша11, термиялық өңдеу ұшпа химиялық заттарды бұзып, алма шырынының органолептикалық қасиеттеріне әсер етуі мүмкін. Термиялық өңдеу әдістеріне балама ретінде аса сыни көмірқышқыл газы, ультракүлгін сәулелену, ультрадыбыс, жоғары гидростатикалық қысым немесе жоғары қысымды гомогенизация жатады.12Бұл технологиялардың тиімділігі және қолайлы жеміс шырындарының өнімділігі қолданылатын параметрлер мен өнімнің сипаттамаларына байланысты. Олардың кеңінен қолданылуы жоғары шығындармен, кейбір тағам өнімдерінің сапасына кері әсер етумен немесе ферменттердің жеткіліксіз инактивациясымен шектеледі.13,14
Лакказа жеміс шырынын тұрақтандыру және мөлдірлеу үшін қолданылуы мүмкін.15Гөкмен және т.б.16жеміс шырынын тазарту үшін лакказаны қолдануды ұсынамыз, себебі ол фенолдық қосылыстарды кез келген ультрафильтрациялық мембрана арқылы оңай кетірілетін полимерлерге немесе олигомерлерге айналдыру арқылы тиімді түрде жояды, бұл алма шырынының 50°C температурада алты аптаға дейін тұрақты түсі мен мөлдірлігін сақтауға мүмкіндік береді. Тазартылған *Trichoderma* лакказасы алюминий оксиді түйіршіктеріне иммобилизацияланып, алма шырынының микробтық ластануынан туындаған жағымсыз дәм қосылыстарын селективті түрде жою үшін қолданылды.17
Алма шырынының ұшпа компоненттерінің шамамен 80-90%-ы эфирлер мен альдегидтер болып табылады, олар шырынға ерекше хош иіс береді.18*Trametes versicolor* лакказасы алма шырынын тазарту үшін жас кокос қабықтарынан алынған табиғи талшықтардан жасалған арзан тірекке иммобилизацияланды.19Алдыңғы зерттеулер алма шырынының тұрақтануын (түсі мен лайлылығын) ферментсіз немесе иммобилизациялау әдістерін қолдану арқылы немесе ультрафильтрациямен бірге зерттеді.5,19Дегенмен, сақтау кезінде алма шырынының физико-химиялық қасиеттеріне саңырауқұлақ лактазаларының әсері әлі күнге дейін түсініксіз. Сондықтан, бұл зерттеудің мақсаты саңырауқұлақ лактазаларымен өңделгеннен және екі апталық тоңазытқышта сақталғаннан кейін алма шырынының физико-химиялық қасиеттерінің, фенолдық қосылыстардың құрамының және антиоксиданттық белсенділігінің өзгерістерін эксперименттік түрде зерттеу болды. Лактазалар фенолдық қосылыстарды тотықтыру қабілетіне ие, бұл оларды шырынды тазартуды қоса алғанда, әртүрлі өнеркәсіптік процестерде қолдану үшін перспективалы етеді. Бұл зерттеуде *Pleurotus ostreatus* NRC 620 лактазалары зерттелді, олардың белсенділігі мен шырынды тазартудағы тиімділігі үшін тамаша жағдайларға назар аударылды. Устрица саңырауқұлақтары (P. ostreatus NRC 620) бойынша зерттеулер әлі де шектеулі болғанымен, бұрынғы зерттеулер Trametes versicolor және Ganoderma lucidum сияқты әртүрлі саңырауқұлақ көздерінен алынған ферменттерді зерттеді. Бұл зерттеудің мақсаты бұл ферментті тамақ өнеркәсібінде қолдану мүмкіндігін бағалау және оның ерекше қасиеттерін, әсіресе оның идеалды рН және температурасын атап өту болды.
2,2′-Азооксибис(3-этилбензотиазолин-6-сульфон қышқылы) (ABTS) Sigma-Aldrich (Канада) компаниясынан сатып алынды. Барлық басқа реагенттер аналитикалық деңгейде болды.
Ұлттық зерттеу орталығының Микробтық дақылдарды жинау орталығы белгілі устрица саңырауқұлағының NRC620 штаммын алды. Субкультурадан кейін бұл штамм картоп декстроза агарының көлбеулерінде 4°C температурада сақталды. Инокулятты дайындау әдісі келесідей болды: 10 күндік, толық дамыған мицелий картоп декстроза агарының табақшаларына егіліп, 28°C температурада инкубацияланды. 10 күннен кейін стерильді металл перфораторды пайдаланып, агар ортасынан үш 12 мм диаметрлі мицелий блоктары алынып, 50 мл стерильденген дақыл ортасы бар мақта тығындары бар 250 мл Erlenmeyer колбаларына салынды (рН 5.0, бұрын Отман және т.б. сипаттағандай).20). Дақылдар 28°C температурада 18 күн бойы инкубацияланды. Содан кейін дақылдар Whatman №1 сүзгі қағазы арқылы сүзілді, ал алынған супернатант фермент көзі ретінде қызмет етті.
Лактаза белсенділігі субстрат ретінде ABTS көмегімен анықталды. Реакция қоспасының (2 мл) құрамында 500 мкл 0,3 мМ ABTS (0,1 М натрий цитраты буферінде ерітілген, рН 4,5) және дистилденген сумен сұйылтылған фермент үлгісінің қажетті мөлшері болды.21,22Лакказа бөлме температурасында (28 °C ± 2) ABTS тотықтыра алатынын ескере отырып, ABTS тотығуы 420 нм-де (ε) сіңірілудің жоғарылауын өлшеу арқылы анықталды.420= 36 000 см-1 M -1) Agilent Carry-100 УК спектрофотометрін қолдану арқылы. Минутына 1 мкмоль ABTS тотығу үшін лактаза белсенділігінің бір бірлігі қажет болды. Ақуыз концентрациясы ішкі бақылау ретінде ірі қара малдың сарысу альбуминін пайдаланып, Брэдфорд әдісімен анықталды.23,24
NRC 620 устрица саңырауқұлағы штаммынан ферментті алғаннан кейін, оның белсенділігі 28°C температурада статикалық жағдайда 25 күн бойы әртүрлі өсіру аралықтарында өлшенді.
Температураның лакказа белсенділігіне әсерін зерттеу үшін 20-дан 90 °C-қа дейінгі температура диапазонында тәжірибелер жүргізілді. Ферментті қосып, реакцияны бастамас бұрын, буфер (0,1 М натрий цитраты, рН 4,5) және субстрат (ABTS) араластырылып, әртүрлі температурада 5 минут бойы инкубацияланды. Ферменттің термиялық тұрақтылығы 0,05 М натрий фосфаты буферінде (рН 7,0) сәйкесінше 40, 50, 60 және 70 °C температурада 2 сағат бойы инкубациялау арқылы бағаланды. Содан кейін қалдық белсенділік ABTS субстратын пайдаланып бағаланды.
Лакказа белсенділігіне рН әсері рН диапазоны 2,5-тен 7,0-ге дейінгі 0,1 М цитрат-фосфат буферлерінде субстрат ретінде ABTS қолдану арқылы бағаланды. Фермент ерітіндісі рН тұрақтылығын бағалау үшін 40°C температурада екі сағат бойы 0,1 М цитрат және Tris буферлерінде (рН 3, 4, 6 және 7) инкубацияланды. ABTS субстрат ретінде қолданылған қалдық белсенділік инкубациядан кейін есептелді.
Лакказа әртүрлі металл иондары (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+ және Mn2+) бар натрий фосфаты буферінде (0,05 М, рН 7,0) сәйкесінше 2,5 мМ және 10 мМ концентрациясында 10 минут инкубацияланды. Содан кейін реакцияны бастау үшін субстрат (ABTS) қосылды және салыстырмалы белсенділік бағаланды.
Кинетикалық параметрлерді (Vmax және Km) анықтау үшін рН 4,5 кезінде лакцазамен ABTS тотығуы әртүрлі концентрацияларда (0,025–3 мМ) өлшенді. КинетикалықтұрақтыларМихаэлис-Ментен теңдеуінің мәндері реакция жылдамдығының кері мәнін субстрат концентрациясының функциясы ретінде көрсететін Lineweaver-Burk графигін пайдаланып есептелді. Кинетикалық тұрақтылар GraphPad Prism 6.01 нұсқасын пайдаланып Lineweaver-Burk графигінен есептелді.
Алманы ағын сумен мұқият жуғаннан кейін, олар екіге бөлініп, толығымен автоматты Braun MP80 алма шырын сыққышымен (Германияда жасалған) шырын сығылды. Шырын дәкенің төрт қабаты арқылы сүзілді. Бақылау тобына ешқандай ферменттер қосылмады, ал жаңа дайындалған алма шырынына 2,0% лактаза (сыналған ең тиімді концентрация) қосылды, содан кейін ол 4°C температурада екі апта бойы сақталды.
Титрленетін қышқылдық (TA) және рН Боултон және т.б. әдісі бойынша анықталды.al.27Әрбір үлгінің рН мәні сандық рН өлшегіш (JENWAY 3510 рН метр) көмегімен өлшенді. Титрленетін қышқылдық (TA) келесі формуланы қолдана отырып, алма қышқылына негізделген.
мұндағы V және C – титрлеуде қолданылатын натрий гидроксиді ерітіндісінің көлемі (мл) және концентрациясы (0,1 моль/л). K – алма қышқылының түрлендіру коэффициенті, 0,067-ге тең, ал W – алма шырынының массасы (г).
Жалпы еритін қатты заттар (TDS) барлық шырын үлгілерінің құрамы PAL-1 қалта рефрактометрін (ATAGO, Токио, Жапония) пайдаланып анықталды. Әрбір өлшеуден кейін оптикалық линза деионизацияланған сумен шайылып, әрбір алма шырыны үлгісі үш рет тексерілді. Әрбір үлгінің мәні үш өлшеудің орташа мәні арқылы есептелді. Әрбір алма шырыны үлгісінің орташа ± стандартты ауытқуы да осы нәтижелерді орташа мәні арқылы есептелді.
Алма шырыны үлгілерінің тұтқырлық серпімділігі айналмалы вискозиметр (RV, Rheotest 2, Германия) көмегімен бағаланды. Үлгі вискозиметрдің «S2» цилиндрінің ішіне орналастырылды. Көрінетін тұтқырлық ығысу кернеуінің ығысу жылдамдығына қатысты қисықтың көлбеулігімен көрсетілді, ол ығысу кернеуі мен әртүрлі ығысу жылдамдықтарындағы сәйкес қисықтардан (1,00-ден 437,4 с⁻¹-ге дейін) есептелді. Көрінетін тұтқырлықты есептеу формуласы келесідей:
Мұндағы η – көрінетін тұтқырлық (cP), τ – ығысу кернеуі (dyn/cm²), γ – ығысу жылдамдығы (sec⁻¹), ал (τ) – айналу моменті (α) және цилиндр (Z) мәндерін пайдаланып келесі формуланы қолдана отырып есептеледі: τ = Z α.
Браунинг индексі Мейдав және т.б. әдісі бойынша анықталдыал.2910 мл шырын үлгісі 2750 xg жылдамдықпен 10 минут бойы центрифугаланды. Шырынның үстіңгі қабатының 5 мл-і 5 мл 95% этанолмен араластырылды. Қоспаның абсорбциясы 420 нм толқын ұзындығында Shimadzu ультракүлгін спектрофотометрін (UV-1601 PC) пайдаланып өлшенді.
Жалпы фенолдық мөлшері (ЖФМ) Боултон және т.б. сипаттағандай, Фолин-Чиокалтеу реактивін пайдаланып колориметриялық түрде анықталды.[27]0-ден 500 мг/л-ге дейінгі концентрациялар үшін галл қышқылының стандартты қисығы құрылды (r²= 0,997). Нәтижелер галл қышқылының эквиваленттері ретінде көрсетілген (мг GAE/мл).
25 мкл алма шырынына 125 мкл тазартылған су және 2850 мкл FRAP ерітіндісін қосып, қоспаны қараңғы жерде қалдырыңыз.30мин. Содан кейін Shimadzu UV спектрофотометрін (UV-1601 PC) пайдаланып, 593 нм толқын ұзындығындағы абсорбцияны өлшеңіз. FRAP реагенті 300 мМ ацетат буферін (рН 3.6), 20 мМ темір(III) хлоридін және 10 мМ 2,4,6-трис(2-пиридил)триазинді (TPTZ) (40 мМ HCl-де ерітілген) 10:1:1 қатынасында араластыру арқылы дайындалды. Стандартты қисық Trolox стандартты (R²= 0,999), ал нәтижелер μM Trolox/мл ретінде көрсетілген.
Өңделген және өңделмеген шырындардың антиоксиданттық белсенділігі DPPH бос радикалдарын жою қабілетін бағалау үшін DPPH әдісін қолдану арқылы анықталды.31Он микролитр шырын метанолдағы 1 мл DPPH ерітіндісімен (100 мкМ) араластырылды. Қараңғыда 30 минут реакция жүргізгеннен кейін, қоспаның абсорбциясы Shimadzu ультракүлгін спектрофотометрі (UV-1601 PC) көмегімен 517 нм толқын ұзындығында өлшенді. Нәтижелер калибрлеу қисығына негізделген тролокс эквиваленттері (μM тролокс/мл) ретінде көрсетілді (R2= 0,990).
Алынған деректер NRC 620 устрица саңырауқұлақтарында лакказаның максималды өндірісі ашытудың 18-ші күнінің соңында байқалып, 1302 U/L белсенділігіне жеткенін көрсетті. Бұл лакказа өндірісінің оңтайлы өсіру уақытын анықтауға негіз болды (1-сурет). Фермент өндірісі өсіру уақыты артқан сайын артқанымен, өсу қарқыны өсіру уақытына тікелей пропорционалды болған жоқ; 21 күннен кейін фермент белсенділігі тек 90 U/L-ге (1390 U/L дейін) артты. Сондықтан, өнім өнімділігін өсіру уақытының ұлғаюының экономикалық пайдасымен теңестіру үшін 18 күн сайып келгенде оңтайлы өсіру уақыты ретінде таңдалды.
Pleurotus ostreatus NRC 620 саңырауқұлақтарындағы лактаза өнімділігіне өсіру уақытының әсері. Үш (12 мм) саңырауқұлақ мицелий блоктары 50 мл стерильді ортаға егіліп, содан кейін 28 °C температурада әртүрлі уақытта өсірілді.
Басқа зерттеулермен сәйкес, біздің нәтижелеріміз саңырауқұлақтардың лактаза секрециясының шыңына жетуінің идеалды өсіру кезеңі 7-ден 36 күнге дейін болуы мүмкін екенін көрсетеді.32Эзике және т.б. мәліметтері бойынша.33, *Trametes polyzona* WRF03 ашытудың тоғызыншы күнінің соңына қарай 1637 U/мг ақуыздың меншікті белсенділігімен ең көп мөлшерде лактаза өндірді. Сонымен қатар, Отман және т.б.34*Trichoderma harzianum* S7113 өсірудің бесінші күні көп мөлшерде лактаза бөліп шығаратынын анықтады. Лактаза өндірісінің қарқыны он төртінші күні ең жоғары белсенділікке жетіп, содан кейін біртіндеп төмендеді.34Ферменттің бөлінуі негізгі өсу кезеңінде де болуы мүмкін болса да, ол әдетте аралық кезеңде шыңына жетеді және көміртек немесе азот көзінің тұтынылуымен іске қосылады.34,35
Pleurotus ostreatus NRC 620 лактазасы 50°C-тан 80°C-қа дейінгі кең температура диапазонында жоғары белсенділік көрсеткенімен, ең жоғары белсенділікке (69–98%) жақындады, оның ең жоғары белсенділігі 70°C-та байқалды (2a-сурет). Бұл температура диапазонынан тыс фермент белсенділігі шамамен 70°C-та төмендеді. Бұл нәтижелер ферменттің жоғары температурада белсенді екенін көрсетеді, себебі жоғары температура реакцияның кинетикалық энергиясын арттырады.
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 құрамындағы лакказа белсенділігіне реакция температурасының (a) және рН (b) әсері. Ферментті қосып, реакцияны бастамас бұрын қоспаны әртүрлі температурада 5 минут алдын ала инкубациялау арқылы 20-дан 90 °C-қа дейінгі температураға қол жеткізілді. рН-тың лакказа белсенділігіне әсері 2,5-тен 7,0-ге дейінгі рН диапазонында 0,1 М цитрат-фосфат буфері бар ерітінділерде субстрат ретінде ABTS көмегімен бағаланды.
Эзике және т.б. мәліметтері бойыншаal.33, *Trametes polyzona* WRF03 лактазасы үшін оңтайлы температура 55 °C құрайды, бұл *Ganoderma lucidum* үшін көрсетілген температурамен бірдей.laccase36және *Trametes polyzona* KU-RNW02737 үшін оңтайлы температураға (50 °C) ұқсаслактаза . Baldrian38басқа лигнинді ыдырататын ферменттік жүйелер сияқты, лакказа үшін ең қолайлы температура диапазоны 50-ден 70 °C-қа дейін екенін атап өтеді.
Нәтижелер ферменттің рН 3,0 кезінде ең жоғары белсенділік көрсеткенін, рН 3,5 кезінде 94% белсенділікке жеткенін көрсетті. Дегенмен, ол 2,5-тен 7,0-ге дейінгі кең рН диапазонында белсенді болып қалды (2b-сурет). Сонымен қатар, ол бейтарап немесе сілтілік жағдайлармен салыстырғанда қышқылдық жағдайда жоғары белсенділік көрсетті. Оның белсенділігі 2,5-тен 4,5-ке дейінгі рН диапазонында кемінде 77% болды, бірақ рН 7,0 кезінде шамамен 38%-ға жетті. *Trametes polyzona* WRF03 лакказасы үшін оңтайлы рН 4,533 болды, бұл *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40 және *Trametes hirsuta* 41 лакказалары үшін рН-мен бірдей. Дегенмен, Чайрин және т.б. зерттеуіне сәйкес.42, *Polymorpha f. sp.* WR710-1 лакцазы үшін оңтайлы рН мәні 2,2 құрайды, ал *Polymorpha f. sp.* IBL-04 лакцазы үшін оңтайлы рН мәні 5,043 құрайды. Гидроксид аниондарының (лакцазы ингибиторының) T2/T3 лакцазы мыс атомдарымен байланысуы бейтарап немесе сілтілі рН жағдайында лакцазы белсенділігінің төмендеуінің себебі болуы мүмкін. Бұл T1 орталығынан T2/T3 орталығына ішкі электрон тасымалын бұзуы мүмкін, осылайшашектеушіфермент белсенділігі 23,44
Ферментті әртүрлі температурада инкубациялау арқылы инкубация уақыты мен температурасы ферменттің тұрақтылығына әсер ететіні анықталды. Атап айтқанда, *Trametes polyzona* NRC 620-дан алынған лакказа 40℃ және 50℃ температурада жоғары тұрақтылық көрсетті, 120 минуттан кейін бастапқы белсенділігінің 68,33% және 59,61% сақталды (3a-сурет). Керісінше, бірдей жағдайларда (40℃ және 50℃, 120 минут) *Trametes polyzona* WRF03-тен алынған лакказа белсенділігінің 64,38% және 42,92% сақталды.33Керісінше, инкубация уақыты мен температурасының артуы *Trametes polyzona* NRC 620 лактазасының тұрақтылығын төмендетті; 60℃ және 70℃ температурада 60 минут инкубациялағаннан кейін оның белсенділігі сәйкесінше 39,24% және 1,72%-ға дейін төмендеді (3a-сурет). Тәжірибелік нәтижелерге сәйкес, *Trametes polyzona* WRF03 лактазасы термиялық өңдеу процесінде 40 және 50℃ температурада жоғары тұрақтылық көрсетті.33Сол сияқты, Луангжароенкит және т.б.al.37және Чайрин және т.б.ал.42Trametes polyzona KURNW027 және Trametes polyzona WR710-1 лактазаларының 50 °C температурада 1 сағат бойы тұрақтылығы туралы хабарлады. Әртүрлі биотехнологиялық салаларда қолданылатын пайдалы биокатализатор ретінде лактаза кең температура диапазонында жақсы тұрақтылыққа және өнімділікке ие болуы керек.
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказасының термостатикалық тұрақтылығы (а) және рН тұрақтылығы (b). Термостатикалық тұрақтылық фермент ерітіндісін 0,05 М натрий фосфаты буферінде (рН 7,0) 40, 50, 60 және 70 °C температурада 2 сағат бойы инкубациялау арқылы бағаланды. рН тұрақтылығы фермент ерітіндісін 0,1 М цитрат буферінде және Tris буферінде (рН 3, 4, 6 және 7) 40 °C температурада 2 сағат бойы инкубациялау арқылы бағаланды. Қалдық белсенділік инкубациядан кейін субстрат ретінде ABTS көмегімен есептелді.
Ферменттерді қолдану мен сақтаудың оңтайлы жағдайларын анықтау үшін біз рН-ның лакказа тұрақтылығына әсерін зерттедік. Әртүрлі рН мәндерінің әсер етуі ақуыз құрылымының тұрақтылығына айтарлықтай әсер етті, осылайша фермент молекуласының тұрақтылығы мен белсенділігіне әсер етті. Нәтижелер ферменттің қышқылдық жағдайда онша тұрақты емес екенін көрсетті, ал жоғары рН мәндерінде (бейтарап және сілтілі аймақтар) жақсы тұрақтылық көрсетті. 7,0, 6,0, 4,0 және 3,0 рН мәндерінде 120 минуттан кейін ферменттің сақталу жылдамдығы шамамен 100%, 62,54%, 52,39% және 11,14% болды (3b-сурет). *Strombus multisus* WRF03 лакказасы бейтарап рН мәндерінде (5,5–6,5) жоғары тұрақтылықты және қышқыл рН мәндерінде (4,0-ден төмен) төмен тұрақтылықты көрсетті. рН мәні 5,5, 6,0 және 6,5 болғанда 120 минуттан кейін ферменттің сақталу жылдамдығы сәйкесінше шамамен 82%, 100% және 93% болды.33Хайрин және т.б.42Trametes polyzona WR710-1 өсімдігінен алынған лакказаның рН 6,0-ден 7,0-ге дейінгі диапазонда тұрақты екенін атап өтті, ал Сайед және т.б.45лакказа бейтарап рН жағдайында тұрақтырақ екенін көрсетті. Дегенмен, Cerrena unicolor-дан алынған лакказа сілтілі жағдайда да тұрақтылық көрсетті (рН 9.0)46Зерттелген лактазалар кең рН диапазонында жоғары тұрақтылықты көрсетті. Бұл өнеркәсіптік қолдану үшін маңызды сипаттама болуы мүмкін.
Кейбір металл иондары фермент белсенділігіне ынталандырушы және тежеуші әсер ететіндіктен, олардың фермент белсенділігіне әсерін өнеркәсіптік қолдануда ескеру қажет. Бұл өте маңызды, себебі металл иондары жасушадан тыс ферменттердің тұрақтылығы мен синтезіне әсер етуі мүмкін кең таралған қоршаған орта ластаушы заттары болып табылады.47*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказасына бірнеше металл иондарының әсерін зерттеу үшін біз тиісті тәжірибелер жүргіздік. 4-суретте көрсетілгендей, қолданылған металл түріне байланысты металл иондарының концентрациясын 2,5 мМ-ден 10 мМ-ге дейін арттыру фермент функциясына теріс әсер етті. Мысалы,Mg²⁺ , Co²⁺ , Zn²⁺жәнеCu²⁺фермент белсенділігін ынталандырып, белсендіре алады, алNa⁺ , Mn²⁺ , Ca²⁺жәнеK⁺фермент белсенділігін тежеуі мүмкін. 10 мМ концентрациясында Cu²⁺ және Mg²⁺ иондары *Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказа белсенділігінің ең күшті активаторлары болды, сәйкесінше шамамен 34% және 20% белсендіру дәрежесін қамтамасыз етті. Дегенмен, 10 мМ концентрациясында Ca²⁺ иондары лакказаның ең күшті ингибиторы болды, фермент белсенділігін шамамен 60%-ға төмендетті.
Металл иондарының Pleurotus ostreatus NRC 620 лактазасының белсенділігіне әсері. Лактаза 2,5 мМ және 10 мМ концентрациясында әртүрлі металл иондары бар натрий фосфаты буферінде (0,05 М, рН 7,0) 10 минут бойы инкубацияланды. Содан кейін реакция субстрат (ABTS) қосу арқылы басталды, содан кейін салыстырмалы белсенділік өлшенді.
Біздің нәтижелеріміз Mg²⁺ және Cu²⁺ *Trametes polyzona* WRF03³ белсенділігін арттыратынын анықтаған басқа авторлардың нәтижелерімен сәйкес келеді. Кастано және т.б.⁴⁸ *Xylaria* sp.-тен алынған лакказа белгілі бір дәрежеде мыс иондарымен (Cu²⁺) ынталандырылатынын анықтады. Сонымен қатар, Foroutanfar және т.б.⁴⁹ және Si және т.б.⁵⁰ сәйкесінше *Paraconiothyrium variabile* және *Trametes pubescens* лакказалары бойынша ұқсас зерттеулер жүргізді. Бұл ферменттің II типті мыс байланыстырушы орны (T2) берілген концентрацияда Cu²⁺-мен қаныққан болуы мүмкін, бұл жоғары Cu²⁺³⁹ концентрацияларында лакказа белсенділігінің ынталандырылуын түсіндіруі мүмкін. Ақ шірік саңырауқұлақтарының лактазалары бірнеше мыс атомдарын қамтитын оксидазалар болғандықтан, мыс иондарының лактаза белсенділігіне әсері әртүрлі және ынталандырушы және тежегіштен бейтарапқа дейін ауытқиды.⁵¹ Керісінше, Чжоу және т.б.. [52]деп хабарладыCu²⁺Тайвань жер асты термитінің (Odontotermes formosanus) лакказа белсенділігін тежеді. Дегенмен, Cerena sp. HYB07 лакказалары[53]және Clitocybe maxima[54]мыс иондарының әсеріне ұшырамаған.
Субстраттың ерекшелігі оның кинетикалық параметрлерімен (Km және Vmax) көрсетілді; субстраттың ферментпен байланысу аффинділігі неғұрлым күшті болса, Km мәні соғұрлым төмен және субстраттың ерекшелігі соғұрлым жоғары болады.3,21,55*Pleurotus ostreatus* NRC 620-дан алынған лакказаның кинетикалық параметрлері (Km және Vmax) GraphPad Prism 6.0 бағдарламалық жасақтамасын пайдаланып Lineweaver-Burk графигін салу арқылы анықталды (5-сурет). ABTS субстрат ретінде пайдаланылған кезде нәтижелер 1,99 мМ және 16217 мкмоль болды.мин⁻¹ L⁻¹,сәйкесінше. Элсайед және т.б.21ABTS тотығуының Km мәндері сәйкесінше 0,1 мМ және 0,064 мМ екенін хабарлады, бұл Lac A және Lac B изоферменттерінің ABTS үшін жоғары аффинділігін көрсетеді. Сонымен қатар, Vmax мәндері 0,182 мкмоль болды.мин⁻¹және 0,603 мкмольмин⁻¹сәйкесінше. Алынған Km мәні Trametes polyzona WRF03 көрсеткішінен (8,66 мМ) төмен болды; сонымен қатар, олардың Vmax мәні (1429 ммоль мин⁻¹) да болдытөменгіABTS субстрат ретінде пайдаланған кезде.33 Сол сияқты, Lentinus squarrosulus MR13 және Trametes sp. AH28-2 лактаза концентрацияларының Km мәндері сәйкесінше 0,0714 мМ және 0,025 мМ болды, ал Vmax мәндері 0,0091 мМ мин−1 және 0,67 мМ мин−1 мг−1 болды (ABTS-ке қатысты)сәйкесінше.56,57
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказасының белсенділігіне ABTS концентрациясының әсері зерттелді және бастапқы реакция жылдамдығы мен ABTS концентрациясының кері шамасының Lineweaver-Burk графигі салынды. Кинетикалық параметрлерді (Vmax және Km) анықтау үшін лакказаның әртүрлі концентрациялары (0,025–3,0 мМ) бар ABTS тотығу реакциясы рН 4,5 кезінде өлшенді. Михаэлис-Ментен кинетикалық тұрақтылары реакция жылдамдығы мен субстрат концентрациясының кері шамасының Lineweaver-Burk графигін пайдаланып есептелді. Кинетикалық тұрақтылар GraphPad Prism 6.01 бағдарламалық жасақтамасын пайдаланып Lineweaver-Burk графигінен есептелді.
Пектиназалар сияқты дәстүрлі тазартқыш ферменттер пектинді заттарды гидролиздейді, тұтқырлық пен лайлылықты төмендетеді. Олар құрылымдық полисахаридтерді тиімді түрде ыдыратады және көбінесе целлюлозалар мен гемицеллюлазалар сияқты басқа ферменттермен бірге өнімділік пен мөлдірлікті жақсарту үшін қолданылады. Дегенмен, пектиназалар, әсіресе алма мен жүзім шырыны сияқты шырындарда лайлылық пен тотығу қоңырлануының негізгі себебі болып табылатын фенолдық қосылыстарға арнайы әсер етпейді.58Керісінше, лакказа фенолдық қосылыстардың тотығуын катализдейді, оларды тұндыру немесе сүзу арқылы кетіруге болатын үлкенірек, ерімейтін молекулаларға полимерлейді. Бұл механизм мөлдірлікті жақсартып қана қоймай, сонымен қатар фенолдық қосылыстардан туындаған тотығу қоңырлану ықтималдығын азайту арқылы шырынның сақтау мерзімін ұзартады. Сонымен қатар, лакказа негізіндегі мөлдірлеу процестерін жұмсақ өңдеу жағдайларында (рН 3,5–5,5, температура 25–40 °C) жүргізуге болады, бұл оларды тағамдық немесе органолептикалық қасиеттеріне нұқсан келтірмей нәзік шырындарға жарамды етеді.59Зерттеулер пектиназамен өңдеу шырынды 1-2 сағат ішінде тазарта алатынын көрсетті, ал лакказамен өңдеу фенолдық қосылыстарды толығымен азайту үшін әдетте ұзағырақ реакция уақытын (3-6 сағат) қажет етеді. Дегенмен, бұл процесті ферментті иммобилизациялау немесе лакказаны механикалық тазарту әдістерімен біріктіру арқылы оңтайландыруға болады.60Бұл зерттеуде шикі сығындының ферменттік профилі айтарлықтай лакказа мен α-амилаза белсенділігін көрсетті, ал пектиназа мен ксиланаза белсенділігі өте төмен болды, ал целлюлоза белсенділігі анықталмады. Сондықтан, лайлылық пен фенолдық құрамның төмендеуі негізінен лакказаның әсерінен болды, ал тұтқырлықтың өзгеруі ішінара амилазаның әсерінен болуы мүмкін.
1-кестеде жаңа сығылған алма шырыны мен лакказамен өңделген үлгілердің физика-химиялық параметрлері көрсетілген. Нәтижелер жаңа сығылған алма шырынының өнімділігі (71,59%) лакказамен өңделген үлгілерге қарағанда (87,34%) төмен екенін көрсетті. Бұл нәтижелер Пильник пен Оранждың зерттеу нәтижелерімен сәйкес келеді.61, жеміс өңдеуде ферменттерді қолдану шырын өнімділігін арттыра алатынын, сүзілуді жақсарта алатынын және концентрациясы жоғары сапалы, мөлдір шырын ала алатынын көрсетті. Шырын өнімділігінің артуы негізінен шырындағы еритін қант мөлшерінің артуына байланысты. Жемістердің ферментативті гидролизі кезінде өнімнің жасуша қабырғаларындағы мезоглея мен пектин жойылып, бейтарап қанттар мен қышқылдар сияқты еритін заттарға айналады.62.Ферментпен өңделген алма шырынының рН мәні бақылау тобына қарағанда айтарлықтай төмен болды (P < 0,05), ал екі топтың да рН мәні сақтау кезінде айтарлықтай өсті (1-кесте). Бұл нәтижелер Марк және т.б. нәтижелерімен сәйкес келеді.63, кешью шырынының рН мәні термиялық өңдеуден кейін сақталғаннан кейін төмендегенін атап өтті. Ферментпен өңдеуден кейін пектиннің ыдырауы және галактурон қышқылының түзілуі сақтау кезінде рН жоғарылауына жауапты болуы мүмкін. Ферментпен өңделген үлгілердің рН мәні сақтау кезінде 4,05 және 4,31 аралығында болды, ал өңделмеген алма шырынының рН мәні 4,12 және 4,33 аралығында болды.
Өңделмеген және лактазамен өңделген үлгілердің жалпы қышқылдығы (ЖҚ) сақтау уақыты ұзарған сайын төмендеу үрдісін көрсетті (1-кесте). Қышқылдықтың төмендеуі органикалық қышқылдардың көмірсуларға айналуына немесе ферментативті реакцияларға, сондай-ақ шырынды сақтау кезіндегі тотығуға байланысты болды.64Бақылау алма шырыны мен ферментпен өңделген үлгілердің жалпы қышқылдығы басқа шырындарға қарағанда төмен болды (құлпынай шырыны 0,9%, қара өрік шырыны 2,2%, кумкват шырыны 1,0%, өрік шырыны 2,4%, апельсин шырыны 0,8%), бірақ басқа шырындарға ұқсас (мысалы, алмұрт шырыны 0,3%).62Өңделмеген жаңа сығылған алма шырынындағы бұл айырмашылықтар өсу жағдайлары, генетикалық факторлар, жетілу деңгейі және өңдеу әдістері сияқты әртүрлі факторларға байланысты болуы мүмкін.65Бақылау және лактазамен өңделген алма шырынының жалпы қышқылдығының төмендеуі Сингх және т.б. ұсынған нәтижелерге сәйкес келеді.6674 күн сақталғаннан кейін Jin Nuo алма шырынының жалпы қышқылдығының төмендеуі туралы. Екінші жағынан, Ошмянский мен Войдильо67дәстүрлі тазарту әдістерінің әсерін зерттеген кезде алма шырынының қышқылдығында айтарлықтай өзгерістер байқалмады.
1-кестеде келтірілген нәтижелер лактазамен өңделген алма шырынының жалпы еритін қатты заттарының (ЖҚҚ) мәні өңделмеген үлгідегіден жоғары екенін көрсетеді. Бұл нәтижелер жарияланған зерттеулерге сәйкес келеді.68Сонымен қатар, 1-кестеде бақылау алма шырыны тобының TSS мәні бастапқы уақытта 9,58 болғаны және сақтау мерзімінің соңында 11,05-ке жеткені көрсетілген. Бұл мәндер Хамид және т.б. хабарлаған жаңа алма шырынының TSS мәндерінен төмен.69(сәйкесінше 11,2 және 11,80). Лакказамен өңделген алма шырыны үлгілерінің TSS мәні айтарлықтай өсті, 11,23-тен бастап, 4°C температурада екі апта сақталғаннан кейін 12,93-ке жетті (1-кесте). Сақтау кезінде TSS-тің ұқсас өсуі цитрус жемістерінде, лимондарда және тәтті апельсиндерде де байқалды. Сақтау кезінде жалпы еритін қатты заттардың (TSS) ұлғаюы полисахаридтердің (крахмалдың) моносахаридтерге (қанттарға) гидролизденуіне, шырынның сусыздануына байланысты концентрацияның жоғарылауына және шырындағы пектиннің еритін қатты заттарға ыдырауына байланысты болуы мүмкін. Жалпы еритін қатты заттардың (TSS) ұлғаюы, Хамед және т.б. хабарлағандай, пектин немесе целлюлозаның пектин немесе целлюлоза арқылы еритін қанттарға айналуы немесе крахмалдың қанттарға гидролизденуі арқылы пайда болуы мүмкін еритін қанттардың ұлғаюына байланысты болуы мүмкін.69.Алма шырынының қасиеттеріне лакказаның әсерін көзбен байқауға болады, себебі лакказамен өңделген алма шырыны өңделмеген шырынға қарағанда жақсы ағындылық пен төмен тұтқырлық көрсетеді. Бұл бақылау 1-кестеде көрсетілген; Ферментпен өңделген үлгінің тұтқырлығы 1,87 cP, ал бақылау үлгісінің тұтқырлығы 2,95 cP болды. Тұтқырлықтың бұл айтарлықтай төмендеуі пектин тәрізді заттардың суды ұстау қабілетінің жоғарылауына және біртекті желілік құрылымның пайда болуына байланысты болуы мүмкін.
Бұл зерттеуде лакказаның алма шырынының қоңырлану индексіне (БІ) әсері спектрофотометрді пайдаланып 420 нм толқын ұзындығындағы сіңірілуді өлшеу арқылы зерттелді. Нәтижелер 1-кестеде көрсетілген. Сақтау кезінде өңделген және өңделмеген топтардағы алма шырыны үлгілерінің БІ біртіндеп өсу үрдісін көрсетті. БІ қоңырлану дәрежесін көрсетеді және ... ретінде қызмет ете алады.маңыздыферментативті және ферментативті емес қоңырлану реакцияларының индикаторы. Сақтау кезінде сіңіру айтарлықтай артты (P < 0,05). Сақтау соңында,A420Бақылау және ферментпен өңделген топтардағы алма шырыны үлгілерінің құндылығы сәйкесінше шамамен 217% және 121%-ға артты (1-кесте). Нәтижелер ферментпен өңдеудің қоңырлану дәрежесін шамамен 56%-ға тиімді түрде төмендете алатынын көрсетеді. Безерра және т.б. нәтижелері.[19]] біздің нәтижелерімізге сәйкес келеді; Олар алма шырынын мөлдірлеу үшін лакказа-глутаральдегид-кокос талшығын пайдаланды, бұл оның бастапқы түсін 61%-ға төмендетті.
Жеміс шырындарындағы полифенолдар адам ағзасына оң тағамдық және емдік әсер еткенімен, олар ақуыздармен әрекеттесіп, шырынның бұлыңғырлануына, тұнбалануына немесе лайлануына әкеліп соғады, осылайша өнімнің дәмі мен хош иісін өзгертіп, сақтау мерзімін қысқартады.71Бұл зерттеудің мақсаты Pleurotus ostreatus NRC 620 лакказасын пайдаланып, алма шырынының фенолдық қосылыс мөлшерін қауіпсіз түрде азайту болды. 1-кестеде келтірілген нәтижелер лакказамен өңделген алма шырынының жалпы фенолдық қосылыс мөлшері 4°C температурада сақтау алдында айтарлықтай төмендегенін көрсетеді. Сонымен қатар, зерттелген екі үлгіде де сақтау кезінде жалпы фенолдық қосылыс мөлшері төмендеді (1-кесте). Сандри және т.б. зерттеулері.72ферментпен өңделген алма шырыны өзінің антиоксиданттық белсенділігін және фенолдық қосылыстардың құрамын сақтай алатынын көрсетті. Дегенмен, Леттера және т.б. жүргізген зерттеу нәтижелері.73Апельсин шырынын саңырауқұлақ лактазасымен өңдеу ондағы фенолдық қосылыстардың мөлшерін 45%-ға дейін төмендетуі мүмкін екенін көрсетті.
Фенолдық қосылыстардың бос радикалдарды жою, синглеттік оттегіні тотықсыздандыру және сөндіру, сутегі атомын тасымалдау және бос радикалдарға электрондарды беру сияқты қасиеттері бар екені дәлелденген, бұл оларды күшті антиоксиданттарға айналдырады.74Сондықтан, бұл зерттеуде тоңазытқышта 14 күн сақталған алма шырынының антиоксиданттық белсенділігіне лакказаның әсерін бағалау үшін DPPH және FRAP негізіндегі әдістер қолданылды (2-кесте). Екі әдіс те сақтау кезінде антиоксиданттық белсенділіктің артуын көрсетті, бұл бос фенолдық қосылыстардың көбеюіне немесе Майлард реакция өнімдерінің (MRP) түзілуіне байланысты болуы мүмкін, ал Майлард реакция өнімдері антиоксиданттық белсенділіктің артуының себебі болуы мүмкін.75Ферменттік емес қоңырлану реакциялары (аскорбин қышқылының ыдырауы, Майяр реакциялары және қанттардың қышқылмен катализденетін ыдырауын қоса алғанда) қоңыр пигменттерді (меланоидиндерді) түзеді. Аскорбин қышқылының аралық ыдырау өнімдері және қанттың ыдырау өнімдері (мысалы, карбонил қосылыстары) аминқышқылдарымен Майяр реакциялары арқылы әрекеттесуі мүмкін.76Жемістер мен көкөністерді сақтау кезінде қоңырлауы кеңінен зерттелгенімен, бұл реакциялар туралы түсінігіміз әлі де шектеулі.77FRAP әдісімен салыстырғанда, лактазамен өңделген алма шырыны DPPH әдісімен антиоксиданттық белсенділіктің айтарлықтай төмен екенін көрсетті (2-кесте), және барлық үлгілердің антиоксиданттық белсенділігі сақтау уақыты ұзарған сайын айтарлықтай артты. Бұл зерттеуде антиоксиданттық белсенділікті анықтаудың екі түрлі әдісі қолданылды, себебі олардың принциптері әртүрлі. DPPH әдісі бос радикалдарды бейтараптандыру қабілетін өлшейді, ал FRAP әдісі темір иондарын тотықсыздандыру қабілетін өлшейді. Сондықтан зерттелген үлгілердің антиоксиданттық белсенділігін жақсы түсіну үшін антиоксиданттық белсенділікті анықтаудың бірнеше әдісін қолдану ұсынылады.78
Бұл зерттеудің негізгі тұжырымдарының бірі - *Pleurotus ostreatus* лакказасы NRC 620 70°C және рН 3.0 кезінде оңтайлы белсенділік көрсетеді. *Trametes versicolor* және *Ganoderma lucidum* лакказалары сияқты шырынды мөлдірлеу үшін жиі қолданылатын басқа саңырауқұлақ лакказаларымен салыстырғанда, *P. ostreatus* NRC 620 жоғары термиялық тұрақтылық пен қышқылдығы жоғары рН көрсетеді. *Trametes versicolor* және *Ganoderma lucidum* лакказалары әдетте 50-60°C диапазонында және рН мәндері 3.5 және 5.0 аралығында оңтайлы белсенділік көрсетеді. Бұл айырмашылық шырынды мөлдірлеу тиімділігін жақсартуға ықпал етуі мүмкін, әсіресе қышқыл шырындар үшін, онда рН төмен мәндеріндегі тұрақтылық өте маңызды. *P.-нің бірегей сипаттамасы. Басқа зерттелген саңырауқұлақ лакказаларымен салыстырғанда, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 қиынырақ жағдайларда тиімді жұмыс істеу қабілетін көрсетеді. Оның жоғары оңтайлы белсенділік температурасы өнеркәсіптік қолданудағы әлеуетті артықшылықтарды, мысалы, реакция жылдамдығын арттыру және микробтық ластанудың төмендеуін көрсетеді. Көптеген шырындардың қышқылдық табиғатына жақсы сәйкес келетін оның төмен рН мәні шырынды тазарту процестерінде пайдалы болуы мүмкін. Бұл нәтижелер кең көлемде қолдануды одан әрі зерттеуді ақтайды, бұл *Pleurotus ostreatus* NRC 620 дәстүрлі саңырауқұлақ лактаза көздеріне балама бола алады. Алдыңғы зерттеулермен салыстырғанда, біз оңтайлы температура 60°C, ал оңтайлы рН 3,0 екенін анықтадық. 60°C температурада 80 минут реакциядан кейін *Ganoderma lucidum* лактазасы сақталды.46оның белсенділігінің %.79 Курниавати мен Ницель бойынша80, *Ganoderma lucidum* ферменттері 25°C температурада және рН мәндері 5,0-ден 8,0-ге дейін, ал рН 6,0 және 10-нан 30°C-қа дейінгі температурада тамаша және орташа тұрақтылық көрсетеді. Бұл зерттеуде біз *Pleurotus ostreatus* үшін фермент белсенділігінің оңтайлы рН және температурасы сәйкесінше 3,0 және 70°C екенін анықтадық. Екі сағат бойы 40°C және 50°C температурада инкубациялағаннан кейін фермент өз белсенділігінің сәйкесінше 68,33% және 59,61% сақтап қалды. Сонымен қатар, Pleurotus ostreatus NRC 620 лакцазы 50°C-тан 80°C-қа дейінгі кең температура диапазонында жоғары белсенділік көрсетті, ең жоғары белсенділікке (69%-98%) жетті, ең жоғары белсенділік 70°C температурада байқалды.
Қорытындылай келе, статикалық жағдайларда алынған устрица саңырауқұлағының лактазасы NRC620 әртүрлі рН және температура жағдайларында оңтайлы белсенділік пен тұрақтылықты көрсетті, бұл басқа фермент көздерімен салыстырғанда жоғары тұрақтылықты көрсетті. 10 мМ MgSO₄ және CuSO₄ қосу фермент белсенділігін шамамен 21% және 35%-ға арттырды. Алма шырынына өңделген кезде фермент рН мен тұтқырлықты төмендетті, ал фенолдық құрамы сақтау кезінде аздап төмендеді.
Нәтижелер тамақ өнеркәсібінде, әсіресе сусындарды тазартуда лакказаның әлеуетін растайды. Фенолдық қосылыстарды арнайы ыдырату арқылы лакказа тек лайлылықты азайтып, мөлдірлікті жақсартып қана қоймай, сонымен қатар жұмсақ жұмыс жағдайларында жеміс шырындарының сапасын сақтайды. Желатин, бентонит және силикагель сияқты дәстүрлі тазартқыш заттардан айырмашылығы, лакказа қалдықтар шығармайды немесе сусындардан жағымды хош иістерді кетірмейді, бұл оны экологиялық таза және тұрақты нұсқа етеді. Сонымен қатар, басқа ферменттер мен сүзу әдістерімен салыстырғанда, лакказа өнім сапасына нұқсан келтірмей, мақсатты және үнемді шешім ұсынады.
Киомухимбо, ХД және Бринк, ХГ. Мыс құрамды лактазаларды қолдану және иммобилизациялау стратегиялары; шолу. Heliyon 9, e13156 (2023).
Жарияланған уақыты: 2025 жылғы 15 желтоқсан